近日,我校生命科学学院湖州市医药与环境应用技术重点实验室尚积祯副教授在消除光学探针白蛋白假阳性干扰研究方面取得创新进展,以第一作者身份在国际顶级学术期刊《Angewandte Chemie International Edition》(一区TOP, IF = 16.823)上发表题为“An Oxazine-Based Fluorogenic Probe with Changeable pi-Conjugation to Eliminate False-Positive Interference of Albumin and Its Application to Sensing Aminopeptidase N” 的研究成果。
蛋白酶与许多疾病密切相关,利用光学探针对其高灵敏度、高选择性荧光成像与检测在人类健康研究中具有重要意义。然而,许多荧光探针或荧光团可与生物系统中普遍存在的白蛋白发生非特异性的相互作用,并导致显著的荧光信号增强现象,从而对蛋白酶的准确检测造成严重的假阳性干扰。这已成为一个棘手和难以解决的问题。
针对以上难题,尚积祯副教授与中国科学院化学研究所研究员马会民(杰青)、史文(优青),通过对白蛋白在荧光反应体系中可能存在的各种干扰进行理论分析,提出了一种有效克服白蛋白干扰的新策略,即通过联用白蛋白不敏感的荧光团及其可变的π共轭体系(CCS)来消除白蛋白的影响,并通过设计恶嗪类的氨肽酶N(APN)荧光探针证验了该策略的有效性。实验结果表明,该探针能够对不同细胞系中APN的相对水平进行荧光成像分析,而且能够定量测定高白蛋白的人血清等样品中APN的含量。该研究提出的白蛋白不敏感荧光团及CCS的联用策略具有广泛的应用前景,可用于发展不受白蛋白影响的其它酶或物质的特异性荧光探针。
论文链接:https://doi.org/10.1002/anie.202205043